果糖氨基酸氧化酶的原核表达及在糖化血红蛋白检测中的初步应用

• 作者: 吴亮 姜旭淦 李礼 沈进 陈盛霞 鞠爱萍
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 果糖氨基酸氧化酶 原核表达 糖化血红蛋白
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 临床检验技术研究
• 页码范围: 83-86
• 页数: 4页
• 分类号: R446.1
• 字数: 4295字
• 语种: 中文

摘要

目的 原核表达果糖氨基酸氧化酶(FAOX),建立检测糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的酶法并作初步评价.方法 构建重组质粒pET32a(+)/FAOX,转化大肠埃希菌Rosetta(DE3),获得重组FAOX;以糖基化六肽为底物检测酶活性；初步建立检测HbA1c的酶法并进行方法学评价.结果 重组FAOX在Rosetta(DE3)中高效表达,SDS-PAGE电泳分析显示其相对分子质量(Mr)约65 000;酶比活性为22 U/mg;建立的检测HbA1c酶法的批内、批间、日间CV均＜5％；低值(5.1％)和高值(15.8％)HbA1c的回收率分别为98.1％和98.9％；总胆红素(＜220 μmol/L)、三酰甘油(＜10.8 mmol/L)和维生素C(＜500 mg/L)对酶法检测HbA1c无影响；与HPLC法和HA-8160型全自动糖化血红蛋白仪测定结果进行比较,相关系数分别为0.977和0.993.结论 FAOX可在大肠埃希菌Rosetta(DE3)中高效表达,用其建立的检测HbA1c的酶法可满足临床对HbA1c测定的要求.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈盛霞	江苏大学基础医学与医学技术学院	48	347	13.0	16.0
2	姜旭淦	江苏大学基础医学与医学技术学院	48	252	10.0	14.0
3	吴亮	江苏大学基础医学与医学技术学院	51	245	11.0	15.0
4	李礼	滨海县人民医院检验科	13	46	4.0	6.0
5	鞠爱萍	江苏大学基础医学与医学技术学院	3	8	1.0	2.0
6	沈进	江苏大学基础医学与医学技术学院	3	9	1.0	3.0