人胰岛素样生长因子1基因转染脂肪源性干细胞的效应**☆

• 作者: 丁昌荣 吕成昱 周峰 张海宁 王英振 续宗耀
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脂肪干细胞 胰岛素样生长因子 脂肪源性干细胞 基因 转染 细胞增殖 国家自然科学基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 页码范围: 1018-1023
• 分类号: R394.2
• 字数: 4659字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.06.012

摘要

背景:人胰岛素样生长因子1基因对脂肪源性干细胞的增殖和分化也可能会产生有效作用.目的:验证人胰岛素样生长因子1基因转染对体外培养的脂肪源性干细胞的效应.方法:构建含人胰岛素样生长因子1基因的双顺反子真核表达载体 pIRES2-EGFP-hIGF-1,利用阳离子脂质体 Lipofectamine 2000介导转染体外培养的人脂肪源性干细胞.观察基因转染后细胞增殖及形态的变化,倒置荧光显微镜观测标记基因增强绿色荧光蛋白的表达并计算转染效率,酶联免疫吸附试验检测培养上清中人胰岛素样生长因子1的浓度,免疫组织化学染色及 RT-PCR 检测人胰岛素样生长因子1的表达,流式细胞仪检测转染前后细胞周期的变化.结果与结论:测序及酶切证实真核表达载体 pIRES2-EGFP-hIGF-1构建正确.体外培养的脂肪源性干细胞为多种形态并存,转染后6 h 检测到有 EGFP 的表达,至60 h 达到高峰,转染效率为(16±3)%.细胞上清中人胰岛素样生长因子1的浓度在60 h 达到22.65μg/L.免疫组织化学染色及 RT-PCR 均检测到人胰岛素样生长因子1的表达.转染后的细胞分裂增殖加快,细胞群体倍增时间缩短,S 期细胞比例增多.证实人胰岛素样生长因子1基因可有效转染脂肪源性干细胞并表达人胰岛素样生长因子1蛋白质,同时可促进细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王英振	青岛大学医学院附属医院关节外科	128	711	15.0	21.0
2	丁昌荣	青岛大学医学院附属医院东区特检科	18	44	5.0	6.0
3	张海宁	青岛大学医学院附属医院关节外科	70	224	8.0	11.0
4	吕成昱	青岛大学医学院附属医院关节外科	47	245	8.0	13.0
5	周峰	青岛大学医学院附属医院关节外科	8	19	3.0	4.0
6	续宗耀	青岛大学医学院附属医院关节外科	4	14	2.0	3.0