转基因作物pat蛋白的双抗体夹心酶联免疫检测方法研究

• 作者: 南铁贵 张亮 张威 曹振 王保民 王敏 谭桂玉
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 转基因作物 pat基因 pat蛋白 双抗夹心酶联免疫检测法
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1555-1560
• 页数: 6页
• 字数: 5037字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1096.2013.30236

摘要

将克隆到的pat基因构建原核表达载体pET30(+)-pat并在大肠杆菌中进行表达,分离纯化得到高纯度pat蛋白.用所得到的pat蛋白制备了兔多克隆抗体和鼠单抗2F6.多抗效价＞8000,单抗效价为5×104；单抗为IgG1类,轻链为K型.基于抗pat蛋白单克隆抗体和兔多克隆抗体建立了双抗夹心酶联免疫分析方法(Sandwich ELISA).检测范围为1.6 ～ 100μg/L,线性回归方程y=0.6914x-2.572,决定系数为0.9951.用所建立的方法测定了5个转基因抗虫棉和2个非转基因棉花品种叶片中pat蛋白的含量,其中转基因抗虫棉中的3个品种检测出pat蛋白,其余均未检出pat蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王保民	中国农业大学农学与生物技术学院	52	907	17.0	28.0
2	张亮	中国农业大学农学与生物技术学院	6	8	2.0	2.0
3	曹振	中国农业大学农学与生物技术学院	8	60	4.0	7.0
4	张威	中国农业大学农学与生物技术学院	1	5	1.0	1.0
5	谭桂玉	中国农业大学农学与生物技术学院	5	45	3.0	5.0
6	南铁贵	中国农业大学农学与生物技术学院	6	33	3.0	5.0