EPO光激化学发光定量检测方法的建立

• 作者: 任杰 吴丹 李会强 相平 聂庆东 陈凯
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 促红细胞生成素 光激化学发光 方法学评价
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 免疫学技术与方法
• 页码范围: 1202-1206,1215
• 页数: 6页
• 分类号: R392-33
• 字数: 5195字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2013.11.018

摘要

目的:建立双抗体夹心模式光激化学发光免疫(LiCA)技术定量检测血清促红细胞生成素(EPO)的方法,并对方法进行方法学评估.方法:采用棋盘格滴定法,用针对EPO抗原的一个单克隆抗体及两个多克隆抗体,分别包被发光微粒,及进行生物素化,两两配对筛选出最佳双抗体组合,进而确定最佳反应浓度,建立光激化学发光检测EPO的方法,建立标准曲线,评价该方法.研究中采用SPSS19.0软件和ELISA Calc进行统计分析.结果:筛选到一组最适抗体,分别与发光微粒和生物素进行连接,成功建立了EPO定量检测的双抗体夹心模式LiCA方法.该法检测的敏感性为0.09 ng/ml,在0.09~30 ng/ml范围内线性良好.批内变异系数和批间变异系数分别为2.93%和3.86%,EPO浓度高达30 ng/ml时无Hook效应.51例EPO增高及51例健康体检者EPO的测定结果与放射免疫法检测EPO比较具有良好的相关性(r=0.957),建立的参考范围为0.76~6.80 ng/ml.结论:成功建立了双抗体夹心模式的光激化学发光定量检测EPO的方法.该检测方法均具有敏感性高、免洗板、线性范围宽、背景荧光低、快速简便等特点.在EPO检测中具有极好的应用前景,有助于EPO诊断试剂盒的研制.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李会强	天津医科大学医学检验学院免疫学教研室	91	673	13.0	22.0
2	陈凯	天津市北辰医院检验科	17	92	6.0	9.0
3	吴丹	天津市北辰医院检验科	6	25	3.0	5.0
4	聂庆东	清华大学医院检验科	42	240	9.0	12.0
5	任杰	天津医科大学检验学院	17	66	6.0	6.0
6	相平	天津医科大学检验学院	9	42	5.0	6.0