NRF2基因启动子-617C/A基因多态性对内毒素介导巨噬细胞炎症反应的影响

• 作者: 南超 卢中秋 李萌芳 梁欢 洪广亮 赵光举 赵媛媛 邱俏檬 郑金韬
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 启动子(遗传学) 多态性,单核苷酸 炎症
• 年，卷（期）: 2013,（14）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1114-1117
• 页数: 4页
• 字数: 3644字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.14.019

摘要

目的 探讨人核因子E2相关因子(NRF2)基因启动子-617C/A多态性的功能,并观察其对内毒素诱导的巨噬细胞炎症反应的影响.方法 构建分别携带NRF2基因启动子-617C、-617A诱导调控系统的质粒及腺病毒载体.应用构建好的质粒转染HEK293细胞后,以双荧光素酶分别验证NRF2基因启动子-617C/A多态的调控效率；应用构建好的腺病毒载体转染RAW264.7细胞,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测NRF2 mRNA和蛋白表达水平；内毒素刺激巨噬细胞后,应用Western印迹检测NRF2蛋白的表达,ELISA法检测细胞培养上清液中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6和IL-10的水平.结果 NRF2基因启动子617C组的调控效率显著高于-617A组(0.584±0.016与0.258±0.018,P＜0.05).内毒素刺激RAW264.7细胞后,-617C组NRF2蛋白和基因水平表达均明显高于-617A组(1.123±0.080与0.951±0.057,1.889±0.031与1.647±0.323,均P＜0.05).-617 C组上清IL-6、IL-10、TNF-α水平均低于-617A组,其中IL-6、IL-10的表达差异均有统计学意义(均P＜0.05).-617C组IL-6/IL-10也显著低于-617A组(P＜0.05).结论 NRF2基因启动子-617C/A多态性对NRF2的表达具有显著影响,并对内毒素刺激后巨噬细胞炎症反应的平衡有着重要调控作用.