副猪嗜血杆菌外膜蛋白 P5的分段表达及免疫学性质分析

• 作者: 宋帅 岳磊 李春玲 李淼 杨冬霞 谢乐新
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 副猪嗜血杆菌 外膜蛋白P5 抗原性分析
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 页码范围: 48-52
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3560字
• 语种: 中文

摘要

为获得副猪嗜血杆菌外膜蛋白P5的分段表达产物，并对各片段的免疫学性质进行鉴定。采用生物信息学软件分析Omp P5全长基因，设计3对分段引物，PCR分别从HPS汕头分离株（H0801）Omp P5中扩增出P5F1、P5F2和P5F3基因片段，构建于pET-32a（＋）原核表达载体上，并将重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达，利用SDS-PAGE分析蛋白表达情况。将蛋白纯化后，利用ELISA及Western Blot分别鉴定其免疫原性及抗原性。结果表明，扩增得到的Omp P5的3个基因片段与预期大小相符合，基因测序结果与GenBank 公布的序列一致，经SDS-PAGE分析，3个蛋白表达相对分子质量大小都与预期相符。 ELISA和Western Blot分析显示，表达的3个蛋白表现出良好的抗原性和免疫原性。 HPS Omp P5的分段表达为进一步研究HPS保护性表位及疫苗鉴定奠定了新的基础。