一种基于抗氧化反应元件的抗氧化药物筛选模型的制备

• 作者: 刘阳 吕正兵 张耀洲 舒特俊 陈剑清
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 抗氧化药物 药物筛选 抗氧化作用元件 细胞模型 荧光素酶报告基因
• 年，卷（期）: 2013,（15）
• 所属期刊栏目: 药理与临床
• 页码范围: 2112-2117
• 分类号: R965.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.15.016

摘要

目的 利用抗氧化反应元件(ARE)调控荧光素酶(Luc)报告基因的表达水平,建立抗氧化药物筛选细胞模型.方法 构建由ARE调控Luc表达的重组质粒载体pARE-Luc-Neo,使用FuGENE@HD转染剂将重组质粒转染人胚肾上皮Hek293细胞,通过G418进行筛选,使用稀释法挑选阳性单克隆细胞,经抗氧化蛋白诱导剂TBHQ诱导,检测细胞中Luc的活性,筛选Luc高活性的单克隆细胞株.利用白藜芦醇和姜黄素评价阳性克隆的筛选效果,观察5个中药单体穿心莲内酯、隐丹参酮、水飞蓟素、苦参碱和虎杖苷在不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25、50、100μmol/L)时对Luc表达水平的影响.结果 通过检测Luc活性,筛选获得Hek293-ARE,该细胞中的Luc的表达水平受ARE调控,且在一定范围内与诱导剂的浓度呈相关性.穿心莲内酯、隐丹参酮与水飞蓟素有较好的诱导效果.结论 建立的抗氧化药物细胞筛选模型可有效地、高通量地用于抗氧化药物的初步筛选.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张耀洲	浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所	87	372	9.0	15.0
3	吕正兵	浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所	46	82	6.0	7.0
4	陈剑清	浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所	13	12	1.0	3.0
7	舒特俊	浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所	10	5	1.0	2.0
8	刘阳	浙江理工大学生命科学学院生物化学研究所	4	20	3.0	4.0