基于ITS2序列鉴定金樱子及其伪品＊

• 作者: 廖保生 张鹏 焦文静 王丽丽 陈晓辰 韩建萍
• 来源期刊: 世界科学技术-中医药现代化
• 学科: 医学
• 关键词: 金樱子 DNA条形码 ITS2 物种鉴定
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 页码范围: 435-440
• 页数: 6页
• 分类号: R282.5
• 字数: 2600字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11842/wst.2013.03.017

摘要

目的：本文选用金樱子作为研究对象验证DNA条形码鉴定中药材的稳定性及准确性。方法：通过改良的CTAB法提取10份样品的基因组DNA，扩增得到ITS2片段。将得到的片段进行双向测序，运用软件CodonCode Aligner进行拼接，其它6份样品来源于GenBank。将金樱子与混伪品ITS2序列应用MEGA 5.0软件进行序列比对，计算种内、种间距离，构建邻接树（neighbor-joining tree, NJ Tree）。结果：金樱子药材 ITS2序列长度为219~221 bp，存在两个Poly C 结构。金樱子种内平均Kimura 2-parameter（K-2-P）遗传距离为0.005，远小于与混伪品的种间平均K-2-P遗传距离0.574。NJ树结果表明金樱子与混伪品分为两枝，Bootstrap支持率为99%，表现出良好的单系性。结论：ITS2序列作为DNA条形码能准确稳定的鉴别金樱子药材，本研究为保证金樱子临床用药安全提供了技术保障。