骨髓基质细胞介导的微环境对人肝癌细胞株SMMC-7721的作用以及机制研究

• 作者: 严树涓 何方 刘晨 张汝益 施琼 李宝林 杨丹丹 白慧丽
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 骨髓基质细胞 SMMC-7721细胞 趋化因子CCL5 微环境
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1921-1927
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 字数: 4703字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.11.001

摘要

目的:探讨肿瘤微环境中人骨髓基质细胞HS-5对人肝癌细胞SMMC-7721的作用及机制.方法:采用HS-5细胞条件培养基 (HS-5 cell-conditioned medium,HS-5-CM)处理肝癌细胞SMMC-7721,分别通过MTT、划痕和Transwell实验分析对SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭的影响;采用Transwell小室间接共培养SMMC-7721细胞与HS-5细胞,应用实时荧光定量RT-PCR (qRT-PCR)、ELISA或Western blotting分别测定SMMC-7721细胞中趋化因子CCL5及其受体CCR5 的mRNA和蛋白表达;此外加入PI3K抑制剂LY294002后,通过Western blotting检测SMMC-7721细胞中PI3K-Akt通路的相关蛋白Akt及其磷酸化水平的变化,以及qRT-PCR和ELISA检测SMMC-7721细胞中CCL5的变化.结果:HS-5-CM可以促进SMMC-7721细胞增殖、迁移和侵袭;间接共培养后,SMMC-7721细胞中CCL5及CCR5 mRNA和蛋白表达均有增高;PI3K抑制剂LY294002可有效抑制共培养后SMMC-7721细胞中PI3K-Akt通路的激活,并减少其CCL5的分泌.结论:HS-5细胞可以促进SMMC-7721细胞的增殖、迁移和侵袭能力;与HS-5细胞间接共培养,激活了肝癌细胞SMMC-7721的PI3K-Akt通路,从而增加SMMC-7721细胞的CCL5分泌.