shRNA介导的hWAPL表达沉默对人宫颈癌CaSki细胞增殖与凋亡的影响

• 作者: 宋方洲 徐营 曹利仙 沈忠飞 潘巍巍 郭连军
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hWAPL蛋白 短发夹RNA 细胞凋亡 CaSki细胞
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1213-1218
• 页数: 6页
• 分类号: R373.39
• 字数: 3806字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.07.012

摘要

目的:为探讨人半翼(hWAPL)蛋白在细胞增殖与凋亡中的作用及其作为分子靶点用于肿瘤治疗的潜在价值,本研究用RNA干扰技术抑制hWAPL基因的表达,并观察了其对人宫颈癌细胞CaSki细胞增殖和细胞凋亡的影响.方法:实时荧光定量PCR和Western blotting检测hWAPL shRNA的干扰效率；MTT检测细胞增殖；Annexin V-PE和Hoechst 33258染色检测细胞凋亡；蛋白质印迹分析凋亡蛋白cleaved caspase-3和细胞周期抑制蛋白p21、p27的表达.裸鼠荷瘤模型体内研究hWAPL沉默对CaSki细胞增殖的影响.结果:实时荧光定量PCR和Western blotting检测结果表明,筛选到的hWAPL shRNA能有效抑制内源hWAPL的表达.MTT实验表明shRNA介导的hWAPL表达沉默显著抑制CaSki细胞的增殖.Annexin V-PE分析结果表明,hWAPL沉默增加了凋亡细胞数目.细胞核经Hoechst 33258染色出现浓染致密的固缩形态和颗粒状荧光；蛋白质印迹结果显示cleaved caspase-3、p21和p27表达增加；裸鼠成瘤实验表明,hWAPL沉默的肿瘤体积减小,增殖细胞核抗原(PCNA)蛋白表达增加.结论:hWAPL沉默抑制CaSki细胞增殖,促进细胞凋亡,是一个潜在的肿瘤治疗新靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋方洲	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	88	309	9.0	12.0
2	徐营	嘉兴学院医学院生物教研室	45	133	7.0	8.0
3	沈忠飞	嘉兴学院医学院生物教研室	45	155	7.0	10.0
4	曹利仙	嘉兴学院医学院生物教研室	13	48	5.0	6.0
5	郭连军	嘉兴学院医学院生物教研室	22	33	3.0	4.0
6	潘巍巍	重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室	5	15	3.0	3.0