1,25-二羟维生素D3对HaCaT细胞增殖活性及基因组DNA和增殖相关基因启动子甲基化水平的影响

• 作者: 梁功平 王利涛 苏玉文 蒋艳玲 赵明
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 骨化三醇 角蛋白细胞 DNA甲基化
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 885-888
• 页数: 4页
• 字数: 2693字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2013.12.011

摘要

目的 探讨1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对人表皮角质形成细胞株HaCaT细胞增殖活性、基因组DNA总体甲基化水平及增殖相关基因启动子甲基化水平的影响.方法 10-6、10-7、10-8 mol/L1,25(OH)2D3作用HaCaT细胞24 h后,噻唑蓝(MTT)法检测不同浓度1,25(OH)2D3对HaCaT细胞增殖活性的影响;总体DNA甲基化试剂盒检测基因组DNA总体甲基化水平.10-6 mol/L 1,25 (OH)2D3作用HaCaT细胞24h后,实时定量聚合酶链反应(PCR)法检测DNA甲基转移酶(DNMT)和甲基结合蛋白(MBD)mRNA表达水平,甲基化特异性PCR(MS-PCR)检测凋亡相关基因程序化细胞死亡因子5(PDCD5)和基质金属蛋白酶组织抑制因子2 (TIMP2)启动子区DNA甲基化状态.结果 与溶媒对照组比较,10-6 mol/L1,25(OH)2D3处理组HaCaT细胞增殖活性及基因组DNA总体甲基化显著降低(细胞活力:0.152±0.027比0.290±0.017,P＜0.01;总体甲基化:0.187±0.071比0.316±0.049,P＜0.05),DNA甲基转移酶DNMT3a和DNMT3b mRNA水平显著降低(P值＜ 0.01或0.05),甲基结合蛋白MECP2和MBD2、凋亡相关基因PDCD5、TIMP2 mRNA水平显著升高(P值＜ 0.01或0.05).此外,MS-PCR结果显示,1,25 (OH)2D3处理组PDCD5、TIMP2基因启动子区DNA甲基化水平(0.380±0.135,0.460±0.172)较溶媒对照组(0.720±0.121,0.680±0.133)显著降低(均P＜0.05).结论 1,25(OH)2D3可降低HaCaT细胞基因组DNA总体甲基化水平,调控DNA甲基化修饰基因表达.此外,1,25(OH)2D3可降低凋亡相关基因PDCD5、TIMP2特异性启动子区甲基化水平,诱导PDCD5、TIMP2基因表达增加,抑制HaCaT细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	蒋艳玲	湖南省儿童医院皮肤科	14	41	4.0	6.0