青枯菌诱导的花生根全长cDNA文库的构建

• 作者: 姜宝杰 庄伟建 张冲 曾建斌 贺小彦 陈华
• 来源期刊: 热带作物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 花生 青枯病 SMART技术 cDNA文库
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 生物技术与组织培养
• 页码范围: 1941-1946
• 页数: 6页
• 分类号: S565.2|Q943.2
• 字数: 3340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2561.2013.10.015

摘要

以优质抗青枯病花生品种闽花8号为材料,在苗期利用灌根法接种花生青枯菌,分不同时期取根,利用改良的CTAB-LiCl法提取接种和非接种的混合RNA,采用SMART(Switching Mechanism At 5'end of RNATranscript)技术合成双链cDNA,经SfiⅠ酶切后胶回收纯化双链cDNA,连接到质粒载体pDNR-LIB上,电击转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,成功构建了青枯菌诱导的处理和对照混合全长cDNA文库.经鉴定,初级文库库容为1.78×10 cfu/mL,重组率达到99％以上,插入片段集中在750～2 500 bp之间,平均长度约为1 300 bp,经扩增后的文库滴度为2.97×109 cfu/mL.随机挑取部分克隆测序,利用生物信息学软件进行初步分析获得一些EST数据.说明得到了高质量的全长cDNA文库,这为筛选和克隆青枯菌诱导的胁迫相关基因提供了资源基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	庄伟建		53	676	15.0	24.0
2	陈华	福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室	19	60	3.0	7.0
3	张冲	福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室	7	7	2.0	2.0
7	曾建斌	福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室	2	6	2.0	2.0
8	姜宝杰	福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室	1	3	1.0	1.0
9	贺小彦	福建农林大学福建省作物分子与细胞生物学重点实验室	1	3	1.0	1.0