早晚牙菌斑变异链球菌定植差异的定量PCR检测

• 作者: 刘红春 欧阳勇 江山 涂家珍 陈敏珊
• 来源期刊: 中国微生态学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光定量PCR 牙菌斑 变异链球菌
• 年，卷（期）: 2013,（6）
• 所属期刊栏目: 口腔微生态学
• 页码范围: 659-662
• 分类号: R378.12
• 语种: 中文

摘要

目的 采用实时荧光定量PCR检测白天和晚上所形成牙菌斑生物膜中变异链球菌的数量,比较早晚牙菌斑中变异链球菌定植的差异.方法 收集30名健康成人全口口腔洁治后白天和晚上形成的龈上菌斑,提取细菌基因组DNA.合成变异链球菌特异性引物,纯化PCR产物获得目的基因连接于pTA-TA载体,克隆于大肠埃希菌DH5 α感受态细胞.选取阳性克隆测序后纯化质粒DNA,获得质粒标准品.将样本和梯度稀释的质粒标准品进行SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测,确定标准曲线,定量样本中变异链球菌DNA的拷贝数.结果 早晚牙菌斑细菌基因组DNA样本的扩增曲线均在标准品的扩增曲线范围内.晚上所形成牙菌斑中定植的变异链球菌数量(对数值7.67 ±0.77)高于白天定植的变异链球菌数量(对数值7.25±0.62)(P =0.007).结论 牙菌斑的微生物定植存在日夜节奏变化,晚上所形成牙菌斑中变异链球菌数量多于白天.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	江山		10	35	4.0	5.0
2	陈敏珊		28	50	4.0	5.0