miR-378负性调节caspase-3蛋白表达减轻氧-糖剥夺致小鼠N2A细胞缺血损伤

• 作者: 尹艳玲 李俊发 李洁霏 李淑娟 郭颖 钟洁 韩松
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 氧-糖剥夺 缺血性损伤 miR-378 caspase-3 N2A细胞
• 年，卷（期）: 2013,（11）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1446-1451
• 页数: 6页
• 分类号: R339.5
• 字数: 3290字
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨miR-378在氧-糖剥夺(OGD)致小鼠成神经瘤N2A细胞缺血损伤中的作用及其可能分子机制研究.方法 离体培养N2A细胞,采用3 h OGD/24 h复糖复氧模拟缺血/再灌细胞模型,3-(4,5-二甲基噻唑)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)比色法检测N2A细胞生存率,蛋白印迹(Western blot)检测caspase-3蛋白表达,实时定量RT-PCR检测miR-378和caspase-3 mRNA表达,荧光素酶报告基因验证miR-378对caspase-3 mRNA 3'非翻译区(UTR)的直接调控作用.结果 miR-378在N2A细胞内表达水平,随着3 h OGD复糖复氧时间的增加,而显著降低(P＜0.05,n=5)；在3 h OGD/24 h复糖复氧致N2A细胞缺血损伤中,上调或下调miR-378的表达水平可显著提高或降低N2A细胞生存率(P＜0.05,n=6)；而在非OGD条件下,miR-378表达水平改变对N2A细胞生存率则无明显影响；同样,在3 h OGD/24 h复糖复氧条件下,miR-378表达水平的改变可显著影响caspase-3蛋白表达(P＜0.05,n=3)而非caspase-3 mRNA表达水平；共转染pri-miR-378可显著抑制含caspase-3 mRNA 3'-UTR的荧光素酶报告基因的表达(P＜0.05,n=6).结论 miR-378可通过负性调节caspase-3蛋白表达水平,来减轻OGD致N2A细胞缺血损伤,所获实验结果有助于从miRNAs水平为缺血性脑卒中提供潜在的治疗靶点.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李淑娟	首都医科大学附属北京朝阳医院神经内科	64	476	13.0	19.0
2	韩松	首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院	57	148	6.0	9.0
3	郭颖	首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院	15	20	2.0	4.0
4	尹艳玲	首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院	19	46	4.0	6.0
5	李洁霏	首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院	3	4	1.0	2.0
6	钟洁	首都医科大学神经生物学系北京脑重大疾病研究院	4	12	2.0	3.0