APPL1介导瘦素对C2C12细胞GSK-3β活性的影响

• 作者: 刘若冰 包玉倩 徐淼 殷峻 肖元元 贾伟平 陆俊茜 韩峻峰 魏丽
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 瘦素 成肌细胞,骨骼肌 糖原合成酶激酶3 APPL1 瘦素受体
• 年，卷（期）: 2013,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1432-1436
• 页数: 5页
• 字数: 3722字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.18.016

摘要

目的 探讨瘦素对小鼠C2C12细胞内GSK-3β活性的作用及其作用机制.方法 体外培养C2C12细胞,经3d分化诱导成肌管细胞,对已分化的C2C12细胞,瘦素(100 nmol/L)分别处理0、5、15及30 min,利用Western印迹法检测GSK-3β的表达及Ser-9磷酸化水平；免疫共沉淀方法(CO-IP)观察在有无瘦素作用的情况下,APPL1-瘦素受体-GSK-3β之间的相互作用关系；在APPL1基因沉默的C2C12细胞内,观察此情况下GSK-3β的表达及Ser-9磷酸化水平；在过表达GSK-3β或抑制其活性的情况下,观察APPL1的表达及Ser-401磷酸化水平.结果 (1)瘦素呈时间依赖性刺激C2C12细胞GSK-3β Ser-9磷酸化水平升高,其中瘦素处理30 min组较对照组高4.08倍(P＜0.01)；(2)在C2C12细胞内APPL1与瘦素受体及GSK-3β共结合,且在瘦素作用下APPL1-GSK-3β结合能力更强；(3)在APPL1表达沉默时,GSK-3β Ser-9磷酸化水平与对照组相比显著低；(4)GSK-3β可刺激C2C12细胞APPL1 Ser-401位点磷酸化.结论 瘦素通过刺激C2C12细胞GSK-3β Ser-9磷酸化的途径促进肌糖原合成,其作用是通过APPL1直接与瘦素受体及GSK-3β结合来介导的,GSK-3β反过来可刺激APPL1 Ser-401位点磷酸化.