牛凝固血基因组DNA提取方法的比较及优化

• 作者: 俞英 刘爱荣 刘莉莉 吴宏军 张旭 徐青 王东升 王雅春 赵萌
• 来源期刊: 中国畜牧杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 凝固血 基因组DNA 匀浆 DNA提取试剂盒 酚-氯仿法 牛
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 遗传育种
• 页码范围: 1-4,26
• 页数: 5页
• 分类号: S823.2
• 字数: 4116字
• 语种: 中文

摘要

为筛选出一种从牛凝固血中高效获得基因组DNA的方法,本研究选择64个凝固血样,分别进行匀浆破碎和手动剪碎的预处理,结合酚-氯仿抽提和试剂盒提取方法,提取基因组DNA,并选择抗凝血作为参照,对试验耗时、DNA数量和质量进行比较.结果表明:通过对牛凝血块进行匀浆破碎预处理,不仅缩短了蛋白酶K的消化时间,而且获得了高质量基因组DNA,浓度和纯度均达到抗凝血提取效果(P＞0.05).酚-氯仿提取法相比试剂盒法,虽然得到更多量的DNA,但是DNA质量下降,而且试验耗时增加.本研究证实,匀浆破碎预处理后的牛凝固血样可以作为高质量基因组DNA的样本来源,并可替代抗凝血,解决生产中抗凝血不易获得和采集的问题.