RICTOR对类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞活力的影响

• 作者: 刘岩 方霖楷 潘云峰 胡爱玲 郭欣
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: RICTOR蛋白 关节炎,类风湿 成纤维样滑膜细胞 RNA干扰
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 526-530
• 页数: 5页
• 分类号: R593.22
• 字数: 3879字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2013.03.025

摘要

目的:通过siRNA介导的RNA干扰技术沉默类风湿关节炎(RA)成纤维样滑膜细胞(FLS)mTORC2的特异组成蛋白RICTOR的表达,观察其对细胞活力的影响.方法:组织块法培养RA-FLS.应用阳离子脂质体转染的方法,把化学合成的特异性RICTOR siRNA转染RA-FLS,并以转染非特异性siRNA作为阴性对照.利用荧光定量PCR法分析转染24h后细胞RICTOR mRNA表达水平的变化；Western blotting法分析转染48和72 h后细胞RICTOR蛋白表达水平的变化；以噻唑蓝(MTr)比色法检测转染成纤维样滑膜细胞不同时间(24、48和72h) RICTOR siRNA对细胞活力的影响.结果:荧光定量PCR结果显示特异性RICTOR siRNA转染组与对照组相比,细胞中RICTOR的mRNA表达水平显著下调,24h干扰效率达78.3％±63.71％ (P ＜0.01).Western blotting结果显示与对照组相比,RICTOR siRNA转染组48 h和72 h后RICTOR蛋白表达水平明显降低,沉默效率分别为92.48％±6.14％和98.57％±1.40％(均P＜0.01).MTT结果显示,早期(24和48 h)RICTOR siRNA转染组与阴性对照组细胞存活率比较无显著差异；72 h后,RICTOR siRNA转染组与阴性对照相比,细胞活力明显降低,抑制率为90.14％±1.90％ (P＜0.01).结论:转染特异性RICTOR siRNA可降低RA-FLS的活力,提示mTORC2可能与RA-FLS的生长有关.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	胡爱玲	中山大学附属第三医院护理部	67	758	16.0	25.0
2	潘云峰	中山大学附属第三医院风湿免疫科	48	208	8.0	11.0
3	方霖楷	中山大学附属第三医院风湿免疫科	11	67	5.0	8.0
4	刘岩	中山大学附属第三医院风湿免疫科	9	33	4.0	5.0
5	郭欣	中山大学附属第三医院风湿免疫科	4	14	2.0	3.0