胰酶快速消化大鼠皮层神经细胞原代培养方法分析

• 作者: 吴宜娟 徐安定 苗海锋 谭少华
• 来源期刊: 中国实用神经疾病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 神经细胞 原代培养 胰酶
• 年，卷（期）: 2013,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 4-6
• 页数: 3页
• 分类号: R-332
• 字数: 2562字
• 语种: 中文

摘要

目的 探索更简易可行的原代神经细胞培养方法.方法 在文献报道方法的基础上,注射器抽吸制备神经细胞匀浆,0.125%胰酶(含0.2‰EDTA)短时消化脑组织3~5 min,加入含10% 胎牛血清的DMEM培养液,接种于经多聚赖氨酸(poly-L-lysine,PLL)预处理的六孔板上,24 h后加入终浓度为10 μM的阿糖胞苷(arabinofuranoside cytosine,Ara-C) 抑制胶质细胞生长,48 h后更换培养液终止Ara-C的作用.以后每2~3 d更换培养液,神经细胞在含95% CO2培养箱中培养7 d后,用神经元特异烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)染色鉴定神经元纯度.结果 培养细胞成熟后,神经细胞生长良好,NSE染色鉴定证实,神经元纯度超过95%.结论 改良后的胰酶快速消化原代神经细胞培养方法,可减少实验动物用量,减少细胞损伤及污染机会,方法确切可行.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐安定	暨南大学附属第一医院神经内科	102	818	15.0	24.0
2	谭少华	广州市番禺区中心医院神经内科	14	84	5.0	8.0
3	苗海锋	广东东莞市人民医院神经内科	11	62	5.0	7.0
4	吴宜娟	广州医学院第一附属医院神经内科	7	38	4.0	6.0