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摘要:
目的 建立多重PCR方法鉴定伤寒沙门菌,为临床确诊及现场流行病学调查提供快速准确的实验室技术支持.方法 根据沙门菌菌体抗原A/D1群基因、鞭毛抗原基因(fliC-Hd)及伤寒沙门菌Vi抗原基因片段(Vi)设计引物,建立多重PCR体系并进行反应条件优化.选择15株不同血清型沙门菌及18株非沙门菌菌株,对所建立体系的特异性进行检测,并将该体系应用于浙江省分离的50株实际样本的检测.结果 建立并优化了伤寒沙门菌检测的多重PCR体系,优化后25 μl PCR体系包括100 μM dNTPs、2.5 U Taq DNA聚合酶、引物各0.2 μM、模板5 μl;PCR条件为94 ℃变性1 min,56 ℃退火 1 min,72 ℃延伸1 min,共循环35次.该体系具有高特异性,可准确快速鉴定伤寒血清型沙门菌,同时也可区分A群及D群血清群的沙门菌,并能检测鞭毛抗原为Hd及毒力基因Vi阳性的沙门菌,对实际样本检测符合率达100.00%.结论 多重PCR可准确鉴定伤寒沙门菌,能作为传统血清学分型的辅助方法用于伤寒沙门菌的鉴定.
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文献信息
篇名 多重PCR法鉴定伤寒沙门菌的研究
来源期刊 浙江预防医学 学科 医学
关键词 多重PCR 血清型 伤寒沙门菌
年,卷(期) 2013,(1) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 17-19,23
页数 4页 分类号 R447|R516.3
字数 3119字 语种 中文
DOI
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 叶菊莲 50 250 9.0 12.0
2 占利 49 302 9.0 15.0
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研究主题发展历程
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多重PCR
血清型
伤寒沙门菌
研究起点
研究来源
研究分支
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
预防医学
月刊
1007-0931
33-1400/R
大16开
浙江省杭州市滨江区滨盛路3399号
1989
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