九州虫草Zn2+胁迫下金属硫蛋白的诱导产生规律及性质研究

• 作者: 刘凤红 张琪 王朝霞 程显好 郭文娟
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 九州虫草 金属硫蛋白 分离纯化 氨基酸组成 抗氧化活性
• 年，卷（期）: 2013,（21）
• 所属期刊栏目: 药剂与工艺
• 页码范围: 2997-3003
• 分类号: R284.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.21.011

摘要

目的 探讨Zn2+胁迫下九州虫草Cordyceps kyusyuensis金属硫蛋白(MT)的产生及性质.方法 以培养基中添加ZnSO4的方式,研究九州虫草在Zn2+胁迫下MT的产生规律.通过超声波细胞破碎、提取和凝胶柱色谱法对MT进行分离纯化,利用考马斯亮蓝法进行纯度鉴定.用电喷雾质谱法测定MT的相对分子质量,以Ellman's方法测定巯基的量,以原子火焰吸收法测定Zn的量,以Ag饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)测定MT的量,用氨基酸自动分析仪对Zn-MT进行氨基酸组成分析.通过对羟基自由基(HO·)、DPPH自由基(DPPH·)和超氧阴离子自由基(O2-·)的清除率实验探讨九州虫草MT的抗氧化活性.结果 菌丝体中Zn和MT的量随着培养基中Zn2质量浓度(0～15 g/L)的增加而增加.在10L发酵罐培养时,培养基中Zn2+质量浓度为15g/L,培养时间为56 h,金属硫蛋白的量为14.335 mg/g菌丝体(湿质量).对九州虫草的菌体蛋白通过2次凝胶柱色谱,冷冻干燥得到九州虫草MT,电喷雾质谱法测得其相对分子质量为6750,每分子Zn-MT氨基酸总量为56个,含有20个半胱氨酸,含极少量的芳香族氨基酸,可结合6个Zn原子.九州虫草Zn-MT对于HO·、DPPH·、O2-·有较好的清除作用,清除效果依次为O2-· ＞DPPH·＞HO·,其半数清除率质量浓度(IC50)分别为71.49、80.58、100.65mg/L.结论 通过紫外扫描图谱分析、蛋白柱色谱图谱分析、九州虫草Zn-MT理化性质以及抗氧化活性的测定,可以判断其与标准的兔肝MT非常相似,进一步可以确定通过九州虫草菌丝体液态发酵法可生产MT,以期为工业生产提供可靠的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程显好	鲁东大学菌物科学与技术研究院	73	400	10.0	15.0
2	刘凤红	鲁东大学菌物科学与技术研究院	8	39	4.0	6.0
3	郭文娟		14	34	3.0	5.0
4	王朝霞	鲁东大学菌物科学与技术研究院	9	23	3.0	4.0
5	张琪		3	12	2.0	3.0