黄花蒿MCS基因的克隆及其序列分析与原核表达

• 作者: 刘顺会 张军 王丹 王英 谭明俊 贾伟章
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 黄花蒿 2C-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2013,（16）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 2288-2293
• 分类号: R282.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.16.019

摘要

目的 从黄花蒿中克隆MEP途径关键酶2C-甲基-D-赤藓糖醇-2,4-环焦磷酸合成酶(MCS)基因,进行序列特征分析、原核表达以及组织表达的研究.方法 根据黄花蒿MCS (AaMCS)基因EST序列,克隆MCS cDNA及基因组序列.将MCS编码区与表达载体pET-21a(+)重组,构建pET-21a (+)-MCS的原核表达载体并转入大肠杆菌BL21 (DE3),IPTG诱导获得MCS融合蛋白.半定量RT-PCR检测MCS的组织表达情况.结果 AaMCS cDNA全长994 bp,包含681 bp的开放阅读框,编码226个氨基酸,基因全长2 540 bp,包含3个外显子和2个内含子.构建pET-21a (+)-MCS重组质粒,获得稳定的pET-21a (+)-MCS原核表达体系.AaMCS在根、茎、叶、花中均有表达,其中花中表达量较高,根和茎中表达量低.结论 克隆了AaMCS基因,建立pET-2 1a (+)-MCS稳定的原核表达体系,为研究AaMCS蛋白的活性及其功能奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张军	广东药学院生命科学与生物制药学院	11	42	4.0	6.0
2	刘顺会	广东药学院生命科学与生物制药学院	21	149	7.0	11.0
3	贾伟章	广东药学院生命科学与生物制药学院	8	23	3.0	4.0
5	王英	华南农业大学园艺学院	7	54	3.0	7.0
8	谭明俊	广东药学院生命科学与生物制药学院	1	3	1.0	1.0
9	王丹	广东药学院生命科学与生物制药学院	3	5	2.0	2.0