检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺的化学发光间接竞争免疫分析方法的建立

• 作者: 刘迎春 宋宁宁 王权 石金磊 蒋蔚 赵新宇 陈永军
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 莱克多巴胺 单克隆抗体 化学发光间接竞争免疫分析法
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: S859.84
• 字数: 4801字
• 语种: 中文

摘要

将莱克多巴胺(RAC)与戊二酸酐反应,用混合酸酐法使反应产物与牛血清白蛋白(BSA)偶联生成免疫原,并采用淋巴细胞杂交瘤技术制备RAC单克隆抗体,建立检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法.结果显示:飞行质谱法测得RAC-戊二酸单酯分子量为416.2,RAC-戊二酸单酯与BSA偶联比为3.4∶1；RAC单克隆抗体最佳稀释倍数为l:8×104,包被抗原最佳质量浓度为0.5 μg/mL；标准曲线呈线性,回归方程为Y=-0.188 2x+0.392 2,R2=0.993 4,IC50值为0.267 ng/mL;与RAC类似化合物及其他药品无明显的交叉反应.尿样回收率为76.8％ ～90.8％,批内变异系数为6.8％ ～11.5％,批间变异系数为7.2％ ～13.8％；猪肉样回收率为75.2％～ 87.4％,批内变异系数为7.1％～11.6％,批间变异系数为8.6％～14.1％.结果表明:用RAC-戊二酸单脂与BSA偶联物作免疫原成功地研制了针对RAC的特异性抗体,以单抗为基础建立了检测猪尿、猪肉中莱克多巴胺化学发光间接竞争免疫分析法,为进一步研制快速筛选检测试剂盒奠定了基础.