湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲分布及与LDC表达的关系

• 作者: 彭清忠 朱越 李菁 杜次 田向荣
• 来源期刊: 中药材
• 学科: 医学
• 关键词: 蛇足石杉 石杉碱甲 赖氨酸脱羧酶基因(LDC) 高效液相色谱法 半定量RT-PCR
• 年，卷（期）: 2013,（3）
• 所属期刊栏目: 资源
• 页码范围: 361-364
• 分类号: R282.6
• 语种: 中文

摘要

目的:测定湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量,分析石杉碱甲分布与赖氨酸脱羧酶基因(LDC)表达的关系.方法:采用HPLC测定蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量,HPLC条件:Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.08 mol/L醋酸铵(32:68,V/V),流速为1.0 mL/min,柱温为25℃,检测波长为308nm.以肌动蛋白基因为内参物,通过半定量RT-PCR比较LDC在根、茎、叶中的表达量.结果:石杉碱甲在0.5～10.0 μg/mL线性关系良好,平均加样回收率为102％,RSD为0.32％;湘西蛇足石杉根、茎、叶中石杉碱甲含量分别为(118.35 ±0.77) μg/g、(411.09±2.47) μg/g、(562.15±2.86) μg/g;半定量RT-PCR分析表明LDC在根、茎、叶中表达量无明显差异.结论:湘西蛇足石杉不同部位石杉碱甲含量差异显著;推测赖氨酸脱羧酶不是石杉碱甲生物合成中的关键酶.