磷酸三酯酶突变体H23A的真核表达及性质表征

• 作者: 任玉雪 刘景圣 刘洋 张英文 李克剑 詹冬玲 闵伟红
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 磷酸三酯酶 突变体 真核表达 性质
• 年，卷（期）: 2013,（23）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 250-255
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4877字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201323051

摘要

通过同源序列比对和晶体结构分析,嗜热菌Geobacillus kaustophilus HTA426磷酸三酯酶的H23位点高度保守,并且位于金属离子结合位点附近.结合Rosseta design程序设计,本实验将突变体H23A在毕赤酵母GS115中高效表达.通过组氨酸标签镍柱分离纯化、非变性蛋白电泳和Western blotting鉴定表达产物,证明该突变体酶主要是以介于单体和二聚体之间的寡聚形式存在.初步酶学性质研究表明,突变体酶是别构酶,Vmax为92.45U/mg,Hill系数h为1.98;最适温度为70℃,最适pH值为10.0; 70℃的热稳定性良好,半衰期为5.1h,而且大多数二价金属离子对突变体H23A都有激活作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵伟红	吉林农业大学食品科学与工程学院	113	614	13.0	20.0
2	刘景圣	吉林农业大学食品科学与工程学院	154	848	16.0	22.0
3	詹冬玲	吉林农业大学食品科学与工程学院	40	122	6.0	9.0
4	任玉雪	吉林农业大学食品科学与工程学院	6	17	1.0	4.0
5	张英文	吉林农业大学食品科学与工程学院	2	0	0.0	0.0