3种氨肽酶基因在大肠杆菌中的重组表达与比较研究

• 作者: 张梁 张洁 石贵阳 黄武宁
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 氨肽酶 重组表达 酶反应
• 年，卷（期）: 2013,（23）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 200-205
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4803字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201323042

摘要

PCR扩增Bacillus licheniformis 14580、Bacillus subtilis 168、Geobacillus stearothermophilus IFO12589氨肽酶基因,分别酶切连接表达质粒pET-28a,构建重组表达载体pET28a-BLAP、pET28a-BSAP、pET28a-GSAP,酶活力检测表明3个氨肽酶基因均在大肠杆菌宿主BL21(DE3)中获得重组表达.进一步对3株重组菌的氨肽酶粗酶液反应条件进行比较研究,结果表明:重组氨肽酶BSAP与GSAP的粗酶活较高,达到1500U/L以上;BLAP、BSAP、GSAP粗酶的最适酶反应温度分别为50、75、60℃,BSAP温度稳定性最好,在30～70℃时比较稳定;3种重组氨肽酶的最适pH值都是9.0,pH值在8.5～9.0时比较稳定;0.1mmol/L Co2+对酶活有较强的激活作用,BSAP的相对酶活力最高达到195.6％,其他二价金属离子对酶活均有不同程度的抑制,其中Zn2+抑制作用最大;重组质粒pET28a-BSAP、pET28a-GSAP在大肠杆菌中较pET28a-BLAP稳定.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张洁		19	45	4.0	6.0
2	石贵阳		128	1034	17.0	24.0
3	张梁		86	530	12.0	16.0