水蛭ISSR-PCR反应体系的建立及优化

• 作者: 刘庚 常素慧 张香东 朱洪强 杨洪雁 白秀娟
• 来源期刊: 中草药
• 学科: 医学
• 关键词: 水蛭 ISSR-PCR体系 正交设计 体系优化 种质资源
• 年，卷（期）: 2013,（2）
• 所属期刊栏目: 药材与资源
• 页码范围: 215-218
• 分类号: R282.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.7501/j.issn.0253-2670.2013.02.020

摘要

目的 建立并优化水蛭ISSR-PCR反应体系及扩增程序,为水蛭进行遗传多样性研究提供依据.方法 使用引物ISSR825,采用正交优化方法对影响PCR反应的Mg2+、dNTP、引物、TaqDNA聚合酶、模板DNA进行了体系优化,同时对引物的最佳退火温度进行了选择.结果 在25 μL总体积中,其中包括10×PCR缓冲液2.5 μL、Mg2+ 2.0 mmol/L、dNTP0.25 mmol/L、引物0.8 μmol/L、Taq DNA聚合酶2.5 U、模板DNA 2.0 ng/μL,最佳退火温度为49.7℃.结论 所建立的最佳ISSR-PCR反应体系稳定可靠,可用于水蛭遗传多样性评价、不同种源鉴定及亲缘关系分析.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	白秀娟	吉林农业大学中药材学院	158	943	15.0	25.0
3	朱洪强	吉林农业大学中药材学院	32	195	7.0	13.0
6	杨洪雁	东北农业大学动物科学与技术学院	13	172	5.0	13.0
7	刘庚	吉林农业大学中药材学院	7	51	5.0	7.0
8	常素慧	吉林农业大学中药材学院	8	57	5.0	7.0
9	张香东	吉林农业大学中药材学院	3	25	3.0	3.0