shRNA沉默TPX2基因对肺腺癌细胞A549紫杉醇敏感性的影响

• 作者: 刘莹 唐熹 张徽
• 来源期刊: 重庆医学
• 关键词: TPX2基因 短发夹RNA 肺肿瘤 腺癌 药物敏感性
• 年，卷（期）: 2013,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 487-489
• 页数: 3页
• 字数: 3291字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2013.05.003

摘要

目的 观察靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)-短发夹状RNA(shRNA)对肺腺癌A549细胞TPX2基因以及紫杉醇敏感性的影响.方法 将靶向TPX2基因的片段插入载体后构建重组质粒,经Lipofectamine 2000将其导入A549细胞,并进行筛选及克隆化培养.细胞分3组培养:(1)转染组;(2)阴性对照组;(3)空白对照组.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及蛋白印迹法(Western Blot)分析转染前后TPX2基因的表达情况.MTT法检测转染干扰载体后A549细胞对紫杉醇化疗的敏感性变化.RT-PCR检测肺耐药蛋白(LRP)及多药耐药相关蛋白(MRP)mRNA表达水平的变化.结果 与对照组相比,转染重组质粒后,TPX2基因的表达明显降低,MTT法显示转染TPX2-shRNA载体质粒的A549细胞对紫杉醇的敏感性明显增加;RT-PCR检测相关基因显示,LRP、MRP mRNA表达水平与空白对照组相比无明显改变(P>0.05).结论 TPX2-shRNA干扰载体能有效抑制肺腺癌细胞系A549中TPX2基因的表达,并增强其对化疗药物的敏感性.