交联草酸脱羧酶聚集体的制备及其性质

• 作者: 何美卿 李香香 林日辉 梁跃 秦梦 郑元博 黄文勤
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 草酸脱羧酶 交联酶聚集体(CLEAs) 制备 性质
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 215-219
• 页数: 5页
• 分类号: Q814.4
• 字数: 4381字
• 语种: 中文

摘要

为了获得缓解泌尿系统草酸盐结石病症的酶制剂,用无载体固定化方法——交联酶聚集体(CLEAs)制备交联草酸脱羧酶聚集体.使用基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET32a/Yvr诱导表达制备草酸脱羧酶粗酶液,用30％的乙醇进行沉淀分离提纯,纯化倍数为2.7倍,酶活回收率91.2％；在戊二醛添加量为0.06％、pH5、牛血清白蛋白添加量0.5g/L、4℃的条件下处理该酶2h,得到交联草酸脱羧酶聚集体(oxdc-CLEAs),酶活回收率达95.4％；酶学性质研究表明,相对游离草酸脱羧酶,交联草酸脱羧酶聚集体的耐酸性、耐热性、耐胰蛋白酶降解能力均有提高.