人脐带间充质干细胞与肝细胞共培养可分化为肝样细胞***☆

• 作者: 周进军 张涛 彭晶晶 文峰 朱亚杰 李东 李华 漆仲春 程朋 罗巧丽 苏晓妹 谭勇 魏东
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 脐带间充质干细胞 肝细胞 共培养 细胞分化 细胞培养 肝样细胞 甲胎蛋白 白蛋白 人细胞角蛋白19 省级基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（32）
• 页码范围: 5772-5777
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5421字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.32.005

摘要

背景：文献报道，从骨髓与脐带中分离获得的间充质干细胞可在体外连续传代培养，仍保持干细胞的特性，并在多种细胞因子的“鸡尾酒式”诱导下分化为肝细胞样细胞。目的：进一步验证人脐带间充质干细胞在体外正常人肝细胞共培养体系下是否可分化为肝细胞并探讨其分化方法。方法：采用贴壁法，从脐带中分离培养间充质干细胞，流式细胞仪检测脐带间充质干细胞表面标志。人肝细胞 LO2细胞与人脐带间充质干细胞建立共培养体系，不添加外源诱导因子，分别于第7，14，21天，通过RT-PCR 法检测肝细胞特异标志物甲胎蛋白、白蛋白、人细胞角蛋白19 mRNA的表达，糖原染色进行功能鉴定。结果与结论：从人脐带中可分离得到贴壁生长的间充质干细胞，其中CD29+细胞比例为96.02%，CD105+细胞比例为96.6%，CD34-细胞比例为99.65%，CD105+CD29+双阳性细胞比例为94.84%。与LO2细胞共培养后第7天仅有甲胎蛋白阳性表达；第14天表达白蛋白、人细胞角蛋白19，第21天时，LO2与人脐带间充质干细胞共培养组未出现甲胎蛋白表达；人细胞角蛋白19和白蛋白的表达比第14天略有增强。共培养21 d后，糖原染色呈阳性。结果证实，无需额外添加外源诱导因子，脐带间充质干细胞可在人正常肝细胞共培养的微环境中，向正常肝细胞分化。