一种高效实用的人卵巢表面上皮细胞培养方法**★

• 作者: 周聪 康佳丽 杨文娟 王小霞 蒋文燕
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织构建细胞学实验 人卵巢表面上皮 原代培养 人表皮细胞生长因子 苏木精-伊红染色 免疫细胞化学 生长曲线 省级基金
• 年，卷（期）: 2013,（28）
• 页码范围: 5223-5228
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 7072字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.28.020

摘要

背景：体外分离培养纯度高、活力强且生物学特性稳定的卵巢表面上皮难度很大，目前原代培养主要采用组织块贴壁法和酶消化法，但这两种方法在取材、细胞活力及细胞纯度上都存在一定的问题。目的：建立一种高效实用的人卵巢表面上皮分离、培养和鉴定方法。方法：创新性地运用细胞刷刷取人卵巢表面上皮，以红细胞裂解法、差速贴壁法对细胞进行分离纯化，并向无血清 DMEM-F12培养基中添加人表皮生长因子进行细胞培养。在倒置显微镜下观察细胞形态，应用苏木精-伊红染色和免疫细胞化学染色法对细胞进行鉴定，并绘制生长曲线。结果与结论：卵巢表面上皮培养24 h 开始贴壁生长，7-12 d 后基本达到融合，细胞呈多角形或扁平型，透光性及折光性强。细胞形态符合正常上皮细胞特性，所分离的细胞几乎完全表达上皮细胞表面标志物 CK19。细胞生长良好，可以传6-8代，细胞生长曲线呈“S”形，纯度达95%以上。结果提示细胞刷取培养法操作简单，能够快速分离获得大量卵巢表面上皮，所获得的细胞经红细胞裂解法和差速贴壁法处理后纯度达95%以上，且细胞生长稳定。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周聪	广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科	3	17	3.0	3.0
2	康佳丽	广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科	4	28	3.0	4.0
3	王小霞	广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科	3	17	3.0	3.0
4	蒋文燕	广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科	3	18	3.0	3.0
5	杨文娟	广州医科大学附属广州市第一人民医院妇产科	2	4	1.0	2.0