背景:慢病毒可以感染分裂及非分裂细胞,对于较难转染的原代卵巢颗粒细胞,慢病毒能否成功进行感染?目的:探讨携带 bcl-2基因的慢病毒感染原代人卵巢颗粒细胞的效率及对细胞凋亡的影响。方法:利用分子生物学技术,构建携带 bcl-2基因慢病毒载体,包装成高滴度慢病毒,将重组慢病毒在体外分别以不同感染复数(10,50,100,200,400)感染人卵巢原代颗粒细胞,感染24,48,72,96 h 后观察感染效率及细胞增殖情况,同时采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,利用反转录聚合酶链反应检测 bcl-2基因的转录情况。结果与结论:原代培养人卵巢颗粒细胞24 h 即贴壁,集落样生长,呈多角形或梭形;当感染复数为100时,细胞的形态和生长不受影响,且感染效率较高,感染后72 h 达高峰,其在颗粒细胞中的阳性率达60%;携带bcl-2基因的慢病毒感染原代培养的人卵巢颗粒细胞,可以过度分泌 Bcl-2蛋白,能抑制卵巢颗粒细胞的凋亡。