改良简易法获取人退变椎间盘髓核细胞及生物学特点**★

• 作者: 周跃 李长青 王建 王海 黄博
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 软骨组织构建 髓核细胞 改良简易法 椎间盘 腰椎间盘突出症 细胞培养 细胞增殖 形态学 生物学性能 Ⅱ型胶原酶 细胞生长曲线 国家自然科学基金
• 年，卷（期）: 2013,（28）
• 页码范围: 5139-5144
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 7227字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.28.007

摘要

背景：目前较常应用的原代髓核细胞培养方法，多应用Ⅱ型胶原酶联合胰酶消化法、单纯Ⅱ型胶原酶消化法等，但这些方法获取细胞数量偏少存在一定的缺限。目的：利用改良简易传统的方法从人退变椎间盘获取髓核细胞。方法：分离培养髓核细胞，每日倒置相差显微镜下观察髓核细胞形态，取原代和传代细胞培养悬液进行锥虫蓝细胞活性检测，分别于第1，3，5，7，9，11，13天采用 MTT 法测细胞生长情况，激光扫描共聚焦显微镜观察细胞形态。结果与结论：成功分离出髓核细胞，成功传至 P3代。原代细胞生长为梭形，P1及 P2传代细胞形态多呈三角形或多角形，类似成纤维细胞形态，接近融合时呈铺路石样外观。锥虫蓝染色细胞活力测定原代分离时活力为99%，第3代细胞活力稍下降为93%-95%。髓核细胞随着传代的次数的增加，增殖活性逐渐降低，P2代和 P3代在对数生长期相对 P1代也逐渐趋于平缓。激光共聚焦显微镜观察细胞形态与相差显微镜观察的结果相似。结果提示，改良简易法相对于传统方法能可靠地获取人退变椎间盘多种细胞且所获细胞表现出了良好的生物学性能。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周跃	解放军第三军医大学新桥医院骨科	27	88	6.0	7.0
2	王海	解放军第三军医大学新桥医院骨科	7	13	2.0	3.0
3	李长青	解放军第三军医大学新桥医院骨科	9	42	2.0	6.0
4	黄博	解放军第三军医大学新桥医院骨科	1	1	1.0	1.0
5	王建	解放军第三军医大学新桥医院骨科	8	18	3.0	4.0