PI3K和Notch信号通路对哮喘小鼠CD4+T淋巴细胞活化及增殖的协同调控作用

• 作者: 张维溪 李昌崇 杨邦坤 盛安群 聂颖
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 哮喘 小鼠 CD4阳性T淋巴细胞 磷酯酰肌醇3激酶 Notch
• 年，卷（期）: 2013,（44）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3532-3536
• 页数: 5页
• 字数: 3329字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.44.012

摘要

目的 探讨磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)和Notch信号通路对哮喘小鼠CD4+T淋巴细胞活化及增殖的协同调控作用.方法 以卵清白蛋白(OVA)致敏激发法制备16只小鼠哮喘模型,按随机数字表法分为对照组和哮喘组各8只,免疫磁珠法分离哮喘小鼠脾脏原代CD4+T淋巴细胞.在细胞水平分组:未干预组(A组),PI3K抑制剂组(LY294002)(B组),Notch抑制剂组(γ-分泌酶抑制剂,DAPT)(C组),PI3K抑制剂+Notch抑制剂组(D组),均以10 μg/ml的植物血凝素和1000 U/ml的白细胞介素(IL)-2刺激增殖6h后进行干预;用流式细胞术检测CD4+T淋巴细胞内的细胞周期蛋白(Cyclin)A、Cyclin D1和P27kip1的蛋白表达,反转录-PCR测定各指标的mRNA表达.结果 分选后CD4+T淋巴细胞纯度达90.0％±5.2％,CD4+T淋巴细胞的存活率为94.8％±3.2％.哮喘组小鼠脾脏CD4+T淋巴细胞Cyclin A、Cyclin D1蛋白(28.0％±3.5％、14.9％±3.4％)和mRNA(0.55±0.16、1.38±0.42)表达水平均显著高于对照组(13.4％±3.5％、7.7％±1.8％和0.32±0.10、0.92±0.37)(P=0.002、0.036和P=0.007、0.042),而哮喘组P27 kip1蛋白和mRNA表达水平(23.3％±3.9％和0.16±0.03)均显著低于对照组(37.5％±5.8％和0.32 ±0.03,P=0.006和P=0.000).A、B、C、D各干预组哮喘CD4+T淋巴细胞Cyclin D1蛋白和mRNA表达水平分别为12.2％±3.7％、7.3％±3.0％、8.1％±2.3％、4.2％±1.7％和1.71 ±0.44、1.07 ±0.31、1.21 ±0.32、0.62±0.20,B、C、D组均显著低于A组(均P＜0.叭),D组均较B、C组下降更为显著(均P＜0.05).A、B、C、D各组P27 kip1蛋白表达水平分别为22.9％±3.0％、31.6％±5.3％、28.4％±5.6％、44.6％±2.8％,B组显著高于A组(P=0.叭6),D组均显著高于A、B、C组(P =0.003、0.004、0.000);mRNA表达水平分别为0.16 ±0.07、0.36±0.09、0.63±0.08、0.99±0.21,B、C、D组均显著高于A组(P=0.016、0.000、0.000),D组均显著高于B、C组(P =0.000、0.023).A、B、C、D各组CD4+T淋巴细胞Cyclin A蛋白和mRNA表达水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 PI3K信号通路与Notch信号通路通过共同促进CD4+T淋巴细胞内的正性调控因子Cyclin D1表达的上调和负性调控因子P27 kip1表达的下调,而起到协同调控哮喘CD4+T淋巴细胞的活化及增殖的作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李昌崇	温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科	111	595	12.0	18.0
2	张维溪	温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科	37	163	8.0	9.0
3	盛安群	温州医科大学附属育英儿童医院呼吸科	6	33	3.0	5.0