TP17蛋白的重组表达及其在梅毒血清学诊断中的初步应用

• 作者: 何丽斯 侯剑辉 俞辉 刘忠民 张婷 林勇平
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 梅毒 TP17 基因工程 酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2013,（10）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1490-1492
• 页数: 3页
• 字数: 3305字
• 语种: 中文

摘要

目的 通过基因工程技术获得梅毒重组蛋白TP17,并探索其在梅毒血清学诊断中的初步应用.方法 以PCR扩增获得TP17基因,构建pET28b-TP17原核表达载体,将其转化到大肠杆菌BL21中,以IPTG诱导蛋白表达,重组蛋白经镍柱纯化后,以飞行时间质谱和免疫印迹法进行鉴定.建立基于TP17的ELISA间接法,通过检测临床患者的血清标本,评价其与化学发光微粒子免疫分析法(CMIA)和梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)的检测符合率.结果 成功构建了原核表达载体pET28b-TP17,重组蛋白TP17以包涵体形式存在,分子量约20 kD.质谱和免疫印迹分析表明重组蛋白为梅毒蛋白TP17,并且能够与梅毒阳性血清发生特异性反应.基于TP17的ELISA法与CMIA法和TPPA法的符合率均为99.2%(125/126),3种方法检测梅毒特异性抗体的差异无统计学意义.结论 基因工程技术获得的重组蛋白TP17能够与梅毒阳性血清发生特异性反应,有良好的临床应用前景.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘忠民	广州医学院第一附属医院检验科	52	305	9.0	14.0
2	林勇平	广州医学院第一附属医院检验科	52	264	10.0	14.0
3	张婷	广州医学院第一附属医院检验科	23	122	6.0	10.0
4	俞辉	广州医学院第一附属医院检验科	5	7	1.0	2.0
5	侯剑辉	广州医学院第一附属医院检验科	4	21	2.0	4.0
6	何丽斯	广州医学院第一附属医院检验科	1	1	1.0	1.0