Survivin启动子调控的PUMA基因表达载体对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响

• 作者: 余红 刘晓华 税青林 陈绍坤 黄丽
• 来源期刊: 中国妇幼保健
• 学科: 医学
• 关键词: Survivin启动子 PUMA基因 肿瘤靶向性 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2013,（20）
• 所属期刊栏目: 实验与基础研究
• 页码范围: 3339-3341
• 分类号: R737.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.7620/zgfybj.j.issn.1001-4411.2013.28.43

摘要

目的:探讨构建带有肿瘤特异性Survivin启动子的PUMA基因表达载体pUC57-Survivin-PUMA对乳腺癌MCF-7细胞的肿瘤特异性促凋亡作用.方法:化学合成PUMA基因片段克隆至pUC57质粒,构建重组质粒pUC57-PUMA；克隆Survivin启动子序列,取代pUC57-PUMA质粒原有的CMV启动子,构建重组质粒pUC57-Survivin-PUMA,测序鉴定.实验设置pUC57-PUMA组、pUC57-Survivin-PUMA组、阴性对照组(pUC57group)和空白对照组(blank group).将以上各组分别转染人乳腺癌MCF-7细胞及人正常乳腺Hs 578Bst细胞.转染后48h,western blot技术检测各组细胞中PUMA蛋白表达情况,流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:重组质粒经测序鉴定证实符合设计要求,构建成功；MCF-7细胞中pUC57-PUMA组和pUC57-Survivin-PUMA组的PUMA蛋白表达均较对照组显著增高(P＜0.05),而人正常乳腺Hs 578Bst细胞中只有pUC57-PUMA组的PUMA蛋白表达较其他3组显著增高(P＜0.05).MCF-7细胞中pUC57-PUMA组和pUC57-Survivin-PUMA组的细胞凋亡率分别为29.02％和29.31％,均较对照组显著增高(P＜0.05),而人正常乳腺Hs 578Bst细胞中仅pUC57-PUMA组的细胞凋亡率较其他3组显著增高(P＜0.05).结论:Survivin启动子调控的PUMA表达载体能显著增高乳腺癌MCF-7细胞中PUMA的表达,进而促进乳腺癌MCF-7细胞凋亡,而对正常乳腺Hs 578Bst细胞的凋亡不产生影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	税青林	泸州医学院医学生物学与遗传学教研室	60	180	8.0	10.0
2	黄丽	泸州医学院医学生物学与遗传学教研室	14	49	4.0	6.0
3	陈绍坤	泸州医学院医学生物学与遗传学教研室	44	190	8.0	11.0
4	余红	泸州医学院医学生物学与遗传学教研室	47	181	8.0	10.0
5	刘晓华	泸州医学院医学生物学与遗传学教研室	2	7	1.0	2.0