人胚胎成纤维细胞饲养层的制备

• 作者: 孙加斌 潘月晴 顾翔
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 干细胞培养与分化 人胚胎成纤维细胞 极小胚胎样干细胞 细胞培养 细胞分离 饲养层 胚胎 扩增 骨髓 国家自然科学基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（40）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 7096-7101
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.40.012

摘要

背景：极小胚胎样干细胞是近年来发现的一种具有类似胚胎干细胞生物学特性的非造血干细胞，但对其体外培养扩增的方法报道极少。有研究推测，人胚胎成纤维细胞能为人骨髓极小胚胎样干细胞体外培养扩增提供良好的微环境。<br>　　目的：从人胚胎躯干中分离、培养人胚胎成纤维细胞，制备人胚胎成纤维细胞饲养层用于人骨髓极小胚胎样干细胞的培养。<br>　　方法：利用胰酶消化法从孕5-9周龄人胚胎躯干中分离培养人胚胎成纤维细胞。制作饲养层，使用不同浓度丝裂霉素C处理后，用于培养分选后的人骨髓极小胚胎样干细胞，以细胞形态、生长曲线作为胚胎成纤维细胞和饲养层的评价指标。<br>　　结果与结论：从人胚胎中成功分离培养出人胚胎成纤维细胞，该细胞可传代24代以上，且经过传代及冻存复苏后生物学特性无改变。丝裂酶素C低于12 mg/L时，人胚胎成纤维细胞增殖不能完全抑制；高于14 mg/L，人胚胎成纤维细胞可能死亡。12 mg/L丝裂霉素C作用3 h后能较好地抑制人胚胎成纤维细胞的增殖，并且保持其活力约2周，可以在很长一段时间内用作人骨髓极小胚胎样干细胞的饲养层。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	顾翔	江苏省苏北人民医院心内科	38	80	5.0	7.0
2	孙加斌	江苏省苏北人民医院心内科	2	2	1.0	1.0
3	潘月晴	江苏省苏北人民医院妇产科	1	1	1.0	1.0