新杂合双突变致遗传性抗凝血酶缺陷症的分子机制

• 作者: 周兆熊 张皓 张纪蔚 梁卫 薛冠华 谢辉 邓昊昱 陈佳佺 顾怡
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 静脉血栓栓塞 突变 抗凝血酶缺陷症
• 年，卷（期）: 2013,（1）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 61-64
• 页数: 4页
• 字数: 3698字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2013.01.019

摘要

目的 探讨抗凝血酶(AT)新杂合双突变致遗传性抗凝血酶缺陷症的分子机制.方法 将野生型质粒(AT wt)及突变型质粒(AT-c.134G＞A、AT-c.342T＞G、AT-c.134G＞A和c.342T＞G)瞬时转染HEK293T细胞进行体外表达.Western印迹检测质粒转染细胞裂解液中AT抗原；同源模建构建AT三维空间结构,细胞免疫荧光染色检测AT蛋白在细胞内的分沁情况.结果 Western印迹:AT-c.342T＞G和AT-c.134G＞A和c.342T＞G质粒转染细胞裂解液AT蛋白表达趋势明显增加.同源模建显示第82位碱基突变为Arg后致碱基侧链明显延长,与周围碱基距离缩短.第13位碱基突变为Gln后致局部空间结构改变,与肝素间距离延长.激光共聚焦显示:AT突变体质粒表达蛋白在内质网中聚集增加.结论 新杂合双突变(AT-c.134G＞A和c.342T＞G)致遗传性抗凝血酶缺陷症的分子机制为突变体AT在细胞内潴留,并且AT-c.342T＞G突变起主导作用.