北京棒杆菌AS1.299高丝氨酸脱氢酶突变体D206G的酶学性质表征

• 作者: 刘嘉 方丽 申术霞 詹冬玲 许金坤 郭永玲 闵伟红
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 北京棒杆菌 高丝氨酸脱氢酶 定点突变 酶学性质
• 年，卷（期）: 2013,（7）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 240-244
• 页数: 5页
• 分类号: Q814.9
• 字数: 3764字
• 语种: 中文

摘要

高丝氨酸脱氢酶(HSD)是天冬氨酸族氨基酸合成途径的关键酶,在苏氨酸和蛋氨酸生物合成中起到重要作用.将来自于北京棒杆菌AS 1.299的HSD在E.coli BL21(DE3)中成功构建并进行高效异源表达.通过分子对接与同源序列比对发现,206位点参与底物结合,并且在家族中高度保守,因此对突变体D206G进行研究.结果表明:突变体最适pH7.5,最适反应温度37℃,半衰期为4h,并对金属离子和有机溶剂显示出良好的抗性.同野生型相比,突变体Km值减小,可能是由于侧链官能团减小,空间位阻降低,有利于底物结合.