过量表达乳酸脱氢酶的重组干酪乳杆菌构建及发酵性能

• 作者: 朱龙宝 李婉珍 葛飞 陶玉贵
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳酸脱氢酶 重组干酪乳酸菌 高效表达 发酵特性
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 245-249
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4298字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201309050

摘要

乳酸脱氢酶(LDH)是干酪乳酸菌L.casei)合成L-乳酸途径中的关键酶,通过构建过量表达乳酸脱氢酶的重组干酪乳杆菌,提高干酪乳杆菌发酵产乳酸的能力.根据干酪乳杆菌乳酸脱氢酶的基因序列设计引物,PCR扩增获得乳酸脱氢酶基因(ldh),将其连接到乳酸杆菌穿梭质粒pMG36e,构建重组质粒pMG-ldh,电转入L.casei,利用红霉素MRS平板筛选阳性克隆,获得表达乳酸脱氢酶的重组菌L.casei pMG-ldh,SDS-PAGE和酶活分析结果表明成功表达了一个约37kD的乳酸脱氢酶蛋白,重组酶活力最高达95U/mL,较原始菌23U/mL提高了近3.1倍.为进一步提高其产乳酸能力,添加4mmol/L激活剂FBP和8mg/L烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)前体物烟酸,结果表明:重组菌L.caseipMG-ldh乳酸积累128.2g/L,生产强度达到3.04g/(L·h),较原始菌株L.casei分别提高了35％和53％,发酵周期缩短6h.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陶玉贵	安徽工程大学生物与化学工程学院	107	366	9.0	13.0
2	李婉珍	安徽工程大学生物与化学工程学院	36	85	5.0	7.0
3	葛飞	安徽工程大学生物与化学工程学院	65	207	7.0	10.0
4	朱龙宝	安徽工程大学生物与化学工程学院	43	147	6.0	10.0