Ⅵ型类人胶原蛋白基因COL6A2的克隆及在毕赤酵母中的分泌表达

• 作者: 孙旸 徐立群 王刚 王皓 陈光 陈欢
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 胶原蛋白 pPIC9K 毕赤酵母
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 224-227
• 页数: 4页
• 分类号: Q812
• 字数: 3009字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201309046

摘要

用PCR方法以Ⅵ型胶原蛋白基因组DNA为模板,获得Ⅵ型胶原蛋白a2链基因,并将该基因插入到表达载体pPIC9K,对重组质粒pPIC9K-COL6A2所含的目的片段进行双向测序.将测序正确的重组质粒用限制性内切酶Sal线性化,经电击转化到毕赤酵母GS115感受态细胞中.通过MM/MD法进行甲醇利用表型的筛选,PCR鉴定目的基因的整合及G418梯度筛选高拷贝转化菌.在酵母a-Factor及AOX1基因启动子和终止信号的调控下,目的蛋白分泌表达到胞外.1％甲醇诱导72h的发酵液,经SDS-PAGE电泳鉴定该重组蛋白分子质量约为32kD.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈光	吉林农业大学生物物理实验室	175	1299	19.0	26.0
2	王刚	吉林农业大学生物物理实验室	47	314	9.0	16.0
3	孙旸	吉林农业大学生物物理实验室	52	349	11.0	16.0
4	陈欢	吉林农业大学生物物理实验室	23	80	6.0	8.0
5	徐立群	吉林农业大学生物物理实验室	2	0	0.0	0.0
6	王皓	吉林农业大学生物物理实验室	2	0	0.0	0.0