角质细胞无血清培养基促进大鼠毛囊干细胞的增殖

• 作者: 张志强 木拉提?热夏提 李佳 王玉杰
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 干细胞培养与分化 毛囊干细胞 培养 角质细胞无血清培养基 增殖 生物活性 生长曲线 流式细胞术 国家自然科学基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（45）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 7918-7923
• 页数: 6页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7721字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.45.015

摘要

背景：以往研究培养毛囊干细胞多使用DMEM/F12+体积分数10%胎牛血清培养基，而进年来开发出的角质细胞无血清培养基也可应用于毛囊干细胞的培养。<br>　　目的：观察3种不同培养基对大鼠毛囊干细胞增殖情况及干细胞纯度的影响。<br>　　方法：取大鼠触须部皮肤组织，体式显微镜下分离出毛囊组织，中性蛋白酶Ⅱ与胰蛋白酶和乙二胺四乙酸混合液“两步酶法”消化。所得细胞悬液按细胞数平均分为3份，分别使用角质细胞无血清培养基、DMEM/F12+体积分数10%胎牛血清及角质细胞无血清培养基+体积分数10%胎牛血清共3种培养基培养，Ⅳ型胶原差速贴壁法筛选毛囊干细胞，进行传代培养。<br>　　结果与结论：培养毛囊干细胞传至第3代，锥虫蓝染色计数法检测结果显示，此3组间细胞活率差异无显著性意义(P>0.05)。CCK8比色法检测细胞生长曲线显示，培养前2 d，此3组细胞生长均较缓慢；培养4 d，细胞生长进入对数生长期，3种培养基培养的细胞增殖活性：角质细胞无血清培养基+10%胎牛血清组>DMEM/F12+10%胎牛血清>角质细胞无血清培养基(P<0.05)。流式细胞仪检测显示，角质细胞无血清培养基组CD34的表达高于角质细胞无血清培养基+10%胎牛血清组(P<0.05)。DMEM/F12+10%胎牛血清组中CD34、β1-整合素(CD29)及CK15标记物的表达低于其他2组(P<0.05)。结果表明，角质细胞无血清培养基较DMEM/F12+体积分数10%胎牛血清能培养出纯度更高的毛囊干细胞，并且在此培养基培养的基础上加入血清，能够促进毛囊干细胞的增殖。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王玉杰	新疆医科大学第一附属医院泌尿外科	170	571	11.0	16.0
2	张志强	新疆医科大学第一附属医院泌尿外科	42	114	6.0	8.0
3	李佳	新疆医科大学第一附属医院泌尿外科	20	66	5.0	7.0
4	木拉提?热夏提	新疆医科大学第一附属医院泌尿外科	3	5	2.0	2.0