重组毕赤酵母葡萄糖氧化酶的纯化和性质

• 作者: 孟延发 师慧 王帅坤 王振伟 郝杰清
• 来源期刊: 食品科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤酵母 葡萄糖氧化酶 纯化 性质
• 年，卷（期）: 2013,（9）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 159-163
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.97
• 字数: 4487字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7506/spkx1002-6630-201309033

摘要

目的:探讨重组毕赤酵母葡萄糖氧化酶(glucose oxidase,GOD)的分离纯化过程及其性质.方法:摇瓶发酵得到的粗酶液经Q-Sepharose Fast Flow层析纯化,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)确定其分子质量,用紫外和荧光分光光度计研究其光谱特征.结果:获得GOD的纯品,酶的纯化倍数为1.35倍,酶活回收率为92.7％,天然分子质量为150kD,亚基分子质量为75kD;酶活力在pH5.0～8.0和55℃以下稳定,最适pH值为6.0,最适温度为40℃；以葡萄糖为底物的酶学动力学常数Km值为21.06mmol/L; Hg2+、Ag+、Cu2+、Fe2+对其有强烈的抑制作用；该酶在275nm波长处有最大紫外光吸收,在344nm波长处有最大荧光吸收峰；液体状态下该酶在4℃条件下放置6个月活性没有损失,常温下可保存3～5d.结论:重组毕赤酵母葡萄糖氧化酶纯化成本低,收率高,有利于大规模纯化,得到的纯品稳定性好,具有较高的利用价值.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孟延发	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	53	262	8.0	12.0
2	王帅坤	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	2	13	2.0	2.0
3	郝杰清	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	2	13	2.0	2.0
4	王振伟	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	3	32	3.0	3.0
5	师慧	四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室	3	14	2.0	3.0