骨髓间充质干细胞中软骨调节素Ⅰ的稳定上调表达

• 作者: 冯亚 周连仲 崔成华 翟立杰 邢双春
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 骨髓干细胞 软骨调节素Ⅰ 骨髓间充质干细胞 软骨细胞 载体 生物因子 组织工程 国家自然科学基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（45）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 骨髓干细胞
• 页码范围: 7847-7854
• 页数: 8页
• 分类号: R394.2
• 字数: 9445字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.45.005

摘要

背景：软骨调节素Ⅰ是一种糖蛋白，主要在软骨中表达，而在骨髓间充质干细胞中少量表达。结合课题组的前期研究，推断软骨调节素Ⅰ在诱导骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化过程中可能会起促进作用。<br>　　目的：构建软骨调节素Ⅰ表达载体，使其在大鼠骨髓间充质干细胞中稳定上调表达。<br>　　方法：在大鼠软骨组织中获取软骨调节素Ⅰ目的基因，使用 pcDNA3.1(+)质粒表达载体构建pcDNA3.1(+)/ChM-I 表达载体。密度梯度离心法和贴壁培养法获得大鼠骨髓间充质干细胞。用脂质体法将构建的pcDNA3.1(+)/ChM-I表达载体转染大鼠骨髓间充质干细胞，使用G418稳定筛选转染细胞，用RT-PCR 及Western blot 检测软骨调节素Ⅰ在细胞株内的表达。<br>　　结果与结论：对阳性克隆的双酶切鉴定及测序和分析对比，结果显示与软骨调节素Ⅰ基因长度相符并且序列无误，且读码框正确。RT-PCR及western blot检测结果显示，软骨调节素Ⅰ的mRNA及蛋白在骨髓间充质干细胞中稳定的高表达。实验成功构建了pcDNA3.1(+)/ChM-I表达载体，并成功将其转染到大鼠骨髓间充质干细胞中，最终使软骨调节素Ⅰ在大鼠骨髓间充质干细胞中稳定上调表达。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	冯亚		6	34	4.0	5.0
2	翟立杰		28	134	7.0	10.0
3	邢双春		8	29	3.0	5.0