MYCT-1基因慢病毒表达载体的构建及鉴定

• 作者: 张昊 翟如波 邱广斌
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: MYCT-1基因 慢病毒载体 胃肿瘤
• 年，卷（期）: 2013,（12）
• 所属期刊栏目: 基础实验研究论著
• 页码范围: 1503-1504,1507
• 页数: 3页
• 字数: 1942字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2013.12.005

摘要

目的 构建携带MYCT-1基因的重组慢病毒载体GV218-MYCT-1,并包装成慢病毒,为进一步研究及动物实验奠定基础.方法 MYCT-1基因片段经PCR扩增后,与酶切线性化的慢病毒载体进行定向连接,获得GV218-MYCT-1重组慢病毒载体并转化细菌感受态细胞.克隆菌落行PCR鉴定,对阳性的重组质粒进行测序并转入293T细胞,荧光显微镜下观察GFP表达并行Western blot鉴定.将重组质粒与慢病毒包装系统一同转染293T细胞进行病毒包装,实时荧光定量PCR法检测病毒滴度.结果 DNA测序结果及Western blot鉴定证实成功构建MYCT-1重组慢病毒载体,对其进行包装后测定慢病毒滴度为2×108TU/mL.结论 成功构建并包装MYCT-1重组慢病毒表达载体.