人外周血内皮祖细胞的分离、培养及鉴定

• 作者: 乔威 冉峰 刘长建
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 干细胞培养与分化 内皮祖细胞 内皮细胞 人外周血 单核细胞 细胞培养 细胞表型 细胞功能 细胞鉴定 省级基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（36）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 干细胞培养与分化
• 页码范围: 6508-6514
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 7755字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.36.020

摘要

背景：内皮祖细胞是成熟内皮细胞的前体细胞，具有新生血管和新生内皮化作用，在许多方面均有广泛应用前景，但其生物学特征及鉴定方法仍存争议。<br>　　目的：探索从人外周血分离培养内皮祖细胞的方法并鉴定其生物学特征。<br>　　方法：外周采血后应用密度梯度离心法分离成人外周血单核细胞，在内皮细胞全培养基重悬后接种于纤维连接蛋白包被的培养瓶中，体外培养扩增获取人内皮祖细胞并观察其形态变化、生长增殖潜能及细胞表面抗原表达情况，并通过细胞一氧化氮分泌功能测定及体外血管形成实验检测其功能学特征。<br>　　结果与结论：体外诱导培养后，六七天形成纺锤样细胞簇，两三周黏附细胞发育形成鹅卵石样外观细胞，逐渐融合呈外生性生长。在相同培养条件下，与人主动脉内皮细胞相比人内皮祖细胞具有高的增殖潜能。人内皮祖细胞表达CD31、CD34、CD144、KDR，表现为典型内皮细胞系表型，此外细胞可摄取ac-LDL并结合UEA-Ⅰ。在功能上内皮祖细胞可分泌一氧化氮并可在Matrigel中形成管腔样结构。提示通过密度梯度离心法分离人外周血单核细胞体外黏附诱导培养可获取人外周血内皮祖细胞；细胞形态、增殖能力、生物表型特征结合细胞功能学的综合性鉴定方法用于内皮祖细胞的鉴定具有一定意义。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘长建	南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科	95	421	12.0	15.0
2	冉峰	南京大学医学院附属鼓楼医院血管外科	39	193	8.0	11.0
3	乔威	江苏省中医院血管外科	4	50	4.0	4.0