冻存脐带间充质干细胞向成骨细胞的分化

• 作者: 李天侠 潘丽杰 袁杰 陈妍
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞 脐带脐血干细胞 脐带间充质干细胞 成骨分化 成骨细胞 免疫表型 组织块贴壁法 骨钙蛋白 骨涎蛋白 省级基金 干细胞图片文章
• 年，卷（期）: 2013,（36）
• 所属期刊栏目: 研究与报告 -- 脐带脐血干细胞
• 页码范围: 6436-6442
• 页数: 7页
• 分类号: R394.2
• 字数: 5928字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.36.009

摘要

背景：在骨组织工程中，脐带间充质干细胞是的一种新兴的种子细胞。目前认为低温冻存是长期保存细胞的有效方法。<br>　　目的：探究冻存的脐带间充质干细胞能否被诱导分化成成骨细胞。<br>　　方法：采用组织块贴壁法从脐带的华尔通氏胶组织中分离出间充质干细胞。然后，用倒置显微镜观察原代细胞的细胞形态。脐带间充质干细胞的免疫表型和细胞周期用流式细胞仪检测。在冻存6个月后，复苏第2代脐带间充质干细胞进行冻存复苏，并传代培养至12代。对第12代的脐带间充质干细胞进行成骨诱导，它的成骨能力分别通过碱性磷酸酶活性检测，骨钙素和骨涎蛋白的免疫荧光检测以及茜素红染色检测来确定。<br>　　结果与结论：原代脐带间充质干细胞呈现典型的成纤维细胞样形态。流式细胞仪显示培养的细胞高表达间充质干细胞的表面标志CD73、CD105和CD90，但是不表达造血细胞的表面标志CD34和CD45。复苏后细胞的存活率是90%。细胞周期显示P8的细胞有75%处于G0/G1期，25%处于S+G2M期。经成骨诱导液处理的第12代细胞显示出比对照组更高的碱性磷酸酶活性(P <0.01)。此外，在成骨诱导液中诱导的细胞对骨钙素和骨涎蛋白的染色呈阳性，并形成矿化了结节。冻存后的脐带间充质干细胞仍保持了它们的生物学特性，并且在成骨诱导液中能被诱导分化成成骨细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	袁杰	哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔预防保健科	52	205	8.0	12.0
2	李天侠	哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔修复科	27	178	8.0	12.0
3	潘丽杰	哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔预防保健科	2	6	2.0	2.0
4	陈妍	哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔预防保健科	2	6	2.0	2.0