真核表达载体pcDNA3-ICOSIg的构建及表达

• 作者: 张睿 王冬梅 许国岩 赵国华
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 组织构建 组织构建基础实验 真核表达 肿瘤 共刺激信号 人可诱导共刺激分子 免疫球蛋白 质粒 基因转染 省级基金
• 年，卷（期）: 2013,（37）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 组织构建基础实验
• 页码范围: 6641-6644
• 页数: 4页
• 分类号: R318
• 字数: 3572字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.37.016

摘要

背景：人可诱导共刺激分子(ICOS)是迄今发现的重要共刺激分子家族成员，可促进激活T细胞的增殖和分泌、调节Th1/Th2细胞的极化、增强依赖T细胞的B细胞功能，阻断ICOS共刺激信号会导致T细胞的克隆失活或克隆无反应，从而诱导肿瘤对机体的免疫逃逸。<br>　　目的：构建表达ICOSIg的质粒，观察其在小鼠体内的表达。<br>　　方法：克隆编码ICOS的胞外片段，将其与编码小鼠免疫球蛋白IgG恒定片段(Ig)的基因融合，构建ICOSIg融合基因及其分泌型真核表达载体 pcDNA3-ICOSIg，酶切鉴定重组子，测序，利用阳性脂质体载体包被pcDNA3-ICOSIg转染小鼠右侧大腿肌肉组织，Western blot法检测血清ICOSIg水平。<br>　　结果与结论：经测序鉴定证实pcDNA3-ICOSIg质粒目的基因片断与Genbank上公布的ICOS序列完全一致，说明质粒构建成功。脂质体载体包被pcDNA3-ICOSIg转染小鼠7 d，在小鼠血清中检测到ICOSIg的阳性表达，说明 pcDNA3-ICOSIg 能够在小鼠肌细胞内表达。证实利用基因合成和重组技术可成功构建真核表达载体pcDNA3-ICOSIg。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵国华	辽宁省肿瘤医院胃外科	21	69	3.0	7.0
2	张睿	辽宁省肿瘤医院大肠外科	19	36	3.0	5.0
3	许国岩	沈阳市铁西区华康医院外科	1	0	0.0	0.0