家蝇Defensin基因原核表达条件的优化及其抑菌活性

• 作者: 徐建华 朱家勇 许琴英 金小宝
• 来源期刊: 广东医学
• 关键词: 抗菌肽 表达 活性 Defensin
• 年，卷（期）: 2013,（16）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2458-2461
• 页数: 4页
• 字数: 4060字
• 语种: 中文

摘要

目的 优化家蝇Defensin基因原核表达条件,并初步研究其抑菌活性.方法 Defensin基因成熟肽被克隆入pGEX-4T-1原核表达载体中,构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,并转化宿主菌后诱导表达,表达过程中对菌液起始浓度、IPTG浓度、诱导温度和时间进行优化.采用亲和层析法分离纯化融合蛋白,SDS-PAGE鉴定目的 蛋白的表达情况和分子量.用凝血酶切除谷胱甘肽标签,并通过体外抑菌实验检测其抗菌活性.结果 成功构建重组质粒pGEX-4T-1/Defensin,目的 基因能够在大肠埃希菌内高效表达,分子量为4 kD,与预期值一致,表达量约达40%.抑菌实验显示其对大肠埃希菌K12D31生长有一定的抑制作用.结论 本实验为家蝇Defensin基因功能的深入研究奠定了工作基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	金小宝		22	41	3.0	4.0
2	朱家勇		17	26	3.0	3.0
3	许琴英	广东医学院寄生虫学暨临床寄生虫检验学教研室	18	107	8.0	9.0
4	徐建华		1	2	1.0	1.0