Ⅱ型胶原酶消化结合组织块贴壁法分离培养兔髓核细胞

• 作者: 李树文 杜志才 武海军 白明 银和平
• 来源期刊: 中国组织工程研究
• 学科: 医学
• 关键词: 骨关节植入物 骨关节损伤基础实验 髓核细胞 Ⅱ型胶原酶消化法 组织块贴壁法 Ⅱ型胶原 聚集蛋白聚糖 体外培养 细胞增殖 省级基金
• 年，卷（期）: 2013,（39）
• 所属期刊栏目: 技术与方法 -- 骨关节损伤基础实验
• 页码范围: 6861-6866
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 5756字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2013.39.001

摘要

背景：椎间盘为负重却缺乏血运的组织，在体外培养过程中存在表型丢失问题，因而容易发生退行性改变，但椎间盘退变的机制尚不明确。<br>　　目的：探讨兔髓核细胞分离、贴壁培养、扩增和鉴定的方法，并观察髓核细胞在不同代次的生长特性。<br>　　方法：应用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块贴壁法相结合的方法，分离、纯化髓核细胞并进行体外扩增，用倒置显微镜观察各代细胞的形态、生长状况，计数细胞数量，并绘制细胞生长曲线。苏木精-伊红染色后光镜下观察细胞形态，免疫细胞化学方法检测细胞Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖的表达情况，并进行细胞鉴定。<br>　　结果与结论：成功的实现了兔髓核细胞体外分离、培养及扩增。生长特性观察发现，髓核细胞第1-3代细胞增殖能力强，活力旺盛，但随着传代次数的增加，细胞增殖能力程逐渐下降的趋势。分离培养的髓核细胞阳性表达聚集蛋白聚糖和Ⅱ型胶原。体外采用Ⅱ型胶原酶消化法和组织块贴壁法相结合，可获得高纯度的髓核细胞，培养的髓核细胞呈类圆形或多角形生长，第1-3代细胞生长活性较强。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李树文		39	190	8.0	11.0
2	银和平		63	337	10.0	13.0
3	白明		33	225	10.0	12.0
4	杜志才		18	113	6.0	10.0
5	武海军		2	10	1.0	2.0