含铁蛋白cyb5融合基因莱茵衣藻核转化表达载体的构建及转化

• 作者: 李明泽 程奇
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞色素b5 信号肽 增强型荧光蛋白 衣藻核转化 玻璃珠转化法
• 年，卷（期）: 2013,（30）
• 所属期刊栏目: 生物技术-研究报告
• 页码范围: 148-158
• 页数: 11页
• 分类号: Q785
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-6850.2013.30.027

摘要

旨在构建并转化细胞色素cytb5基因的衣藻核转化表达载体，为其在衣藻叶绿体中对铁的利用情况研究奠定基础。将克隆的PsaD信号肽、细胞色素b5和增强型绿色荧光蛋白基因的基因融合，插入到pDBle载体中；采用玻璃珠法，将重组子导入莱茵衣藻(CW15)中；经博来霉素筛选获得转基因植株并鉴定。本项研究通过分子克隆技术获得了衣藻自身来源的PsaD信号肽、裂殖酵母来源的细胞色素b5和常用增强型绿色荧光蛋白基因片段；重组质粒pDBle-b5、pDBle-bG和pDBle-TbG测序完全正确；经博来霉素抗性筛选，获得转化衣藻单克隆；通过PCR检测转化衣藻基因组DNA，扩增片段与预期相符。实验结果表明，成功构建了pDBle-b5、pDBle-bG和pDBle-TbG衣藻核转化表达载体，重组质粒已整合到莱茵衣藻基因组中。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程奇	中国农业科学院生物技术研究所	7	36	3.0	6.0
2	李明泽	中国农业科学院生物技术研究所	2	8	2.0	2.0